| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|
| 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),農林牧漁,制藥/生物制藥 | | |
|---|
一、介紹
豬藍耳病毒PCR核酸檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產品，含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR增強劑、上樣染料等所有PCR所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR反應，具有廣泛的用途。
細胞炎癥因子檢測試劑盒的主要組成部分包括特異性抗體、酶標記物、底物、標準品和其他輔助試劑。這些試劑共同作用，使得細胞因子能夠被特異性地捕獲、識別和定量。
1. 方便，用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR實驗。
2. 快捷，操作步驟已經(jīng)限度地簡化，能減少污染，降低實驗誤差。
3. 本產品A型含電泳染料，PCR反應液可直接上樣電泳，進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化，反應的靈敏度高，特異性強。能擴增各種常見的DNA樣品。
5. 產物可直接用于T載體克隆，不需要額外的加A反應。
使用及效果：將本產品15μL與用戶自備的模板，引物和水共15μL混合后，直接進行PCR反應(PCR參數(shù)由用戶自己確定)，反應結束后直接取10μL電泳檢查擴增結果。
二、組成及試劑配制：
1、酶標板：一塊(96孔)。
2、標準品(凍干品)： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200U/L，然后做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)，分別配制成200U/L，100U/L，50U/L，25U/L，12.5U/L，6.25U/L，3.12U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔0U/L。如配制100U/L標準品：取0.3ml (不要少于0.3ml )200U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、樣品稀釋液：1×20ml。
4、檢測稀釋液A：1×10ml。
5、檢測稀釋液B：1×10ml。
三、使用及效果：
PCR反應特點：
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
?、馨谢虻奶禺愋耘c保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
